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其它组分:
描述:
pGEM® -T 载体系统是克隆PCR 产物的方便系统。pGEM®-T载体是通过EcoRV 酶切pGEM®-5Zf(+) 载体,并在两个3`末端加入胸腺嘧啶构建的。pGEM®-T 载体插入位点3`-T 突出端可极大提高PCR 产物的连接效率,因为3`-T突出端可以防止载体的自身环化,并且为某些热稳定性聚合酶产生的PCR 产物提供匹配碱基。这些聚合酶常常以模板不依赖模式在扩增产物的3` 端加上一个脱氧腺苷酸聚合物。 pGEM® -T 载体多克隆区T 突出端的两侧均有BstZI 酶切位点,使用BstZI 单酶消化即可释放插入片段。也可选用适当的双酶消化释放插入片段。pGEM® -T载体系统II 除了pGEM® -T 载体系统I 所有成分外,还包括JM109 感受态细胞。
特点:
快速连接:使用2X 快速连接缓冲液(2X Rapid Ligation Buffer)可以使连接反应在室温下1 小时内完成。
蓝/ 白筛选:载体包含有T7 和SP6 RNA 聚合酶启动子,分别位于β - 半乳糖苷酶的α - 肽编码区内多克隆位点的两侧。α - 肽的插入失活允许在指示培养基上用颜色直接筛选重组克隆。
f1 复制起始位点:可用于制备单链DNA。
原厂资料:
pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体系统可用于PCR产物的克隆。这两种载体是通过 EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM® -T Easy载体,并在3’末端加入胸腺嘧啶构建的。插入位点3’-T突出端可提高PCR产物的连接效率,因为3’-T突出端可以防止载体的自身环化,并且为热稳定性聚合酶产生PCR产物提供匹配碱基。这些聚合酶常常以不依赖模板方式在扩增产物的3’端加上一个脱氧腺苷酸混合物。 pGEM®-T和pGEM®-T Easy高拷贝数载体包含有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,其侧翼和多克隆位点区相接,多克隆位点区位于β半乳糖苷酶的α肽编码区内。α肽插入失活允许在指示培养基用颜色直接筛选重组克隆。另外这两个载体的多克隆位点区的限制性酶切位点适用于采用Promega公司Erase-a-Base®系统(产品目录号#E5750)产生一系列巢式缺失体。 pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体的多克隆位点区含有一些这样的限制性酶切位点,采用这些酶进行单酶切消化即可释放插入片段。如pGEM®-T Easy 载体多克隆区的EcoRⅠ、BstZⅠ和NotⅠ酶切位点。而pGEM®-T 载体多克隆区只有一种这样的酶切位点BstZⅠ。这两种载体也可选用适当的双酶切消化释放插入片段。 pGEM®-T和pGEM®-T Easy 载体含有丝状噬菌体f1复制起始子,可用于制备单链DNA
注意事项:
相关图片
说明书
参考文献
本产品可用于的实验
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