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磷酸钙转染

原理:磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。氯化钙+DNA+ 磷酸缓冲液按一定的比例混和,形成极小的磷酸钙-DNA复合物沉淀粘附在细胞膜表面,借助内吐作用进入细胞质。

优点:能用于任何DNA导入哺乳类动物,瞬时转染和稳定转染都可以。

缺点:1.转染效率低;进入细胞的DNA只有1%-5%可以进入细胞核,其中只有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中稳定表达。2.重复性不佳;PH值,钙离子的浓度,DNA浓度,沉淀反应时间,细胞孵育时间甚至个组分加入顺序和混合的方式都可能对结果产生影响。

磷酸钙转染示意图

 

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