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概念: 印迹技术是指将待测核酸分子结合到一定固相支持物上的方法。
 
southern印迹
概念:将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程。
过程:DNA分子被限制酶切,经琼脂糖凝胶电泳,将DNA片段按照分子量大小分离,然后将含DNA片段的琼脂糖凝胶变性,将其中单链DNA转移到硝酸纤维滤膜或者其他固相支持物上。而DNA片段的相对位置保持不变。可做下一步杂交反应。
 
northern印迹
概念:将RNA变性及电泳分离后,将其转移到固相支持物上的过程。
不能用碱变性,防止水解。用甲醛变性。
 
 
southern印迹的步骤:
1. 从组织中提取DNA
2. 用特定的核酸内切酶酶切
3. 琼脂糖凝胶电泳
4. 碱变性
5. 中和反应
6. 转膜
7. 固定
8. 杂交
9. 杂交信号检测
 
 
northern印迹的步骤:
1. 从细胞中提取总RNA
2. 甲醛凝胶变性电泳
3. 转膜
4. 固定
5. 杂交
6. 杂交信号检测
 
 
western印迹的步骤
1. 蛋白质样品制备
2. SDS-PAGE电泳
3. 转膜
4. 封闭
5. 一抗孵育
6. 二抗孵育
7. 显色


invitrogen

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