收藏本站
热门搜索: A3500  E1910  A1360  25200056  dmem  

按应用分类筛选
正在加载...
按品牌筛选
正在加载...

    分子生物酶缓冲液,是在分子生物酶反应体系中,防止酶失活,提高酶特异性的缓冲液。本分类下,主要包括DNA聚合酶缓冲液、连接酶缓冲液,及限制性内切酶酶切缓冲液。

    DNA聚合酶缓冲液主要应用于PCR扩增,其目的在于为DNA聚合酶提供一个最适的酶催化反应条件。目前最为常用的缓冲体系为10-50mmol/L Tris-HCl (pH8.3-8.8,20℃), Tris是一种双极性离子缓冲液,在实际PCR中,pH变化于6.8-7.8之间。MgCl2是PCR buffer的主要成分之一,Mg2+浓度大小会直接影响产物的产量,DNA聚合酶在识别dNTP以及DNA模板结合形成复合体时需要镁离子的参与。

    连接酶缓冲液(DNA Ligase Buffer)主要应用于催化双链DNA的连接反应,如连接目的片段和载体。连接酶缓冲液成分中含有ATP,ATP将为连接酶反应提供能量。二硫苏糖醇(DTT)和牛血清白蛋白(BSA)是酶保护剂,有助于酶的稳定。

    限制性内切酶酶切缓冲液,酶切实验一般分为单酶切和双酶切反应(Double Digests),通常情况下不同的内切酶的最佳反应条件并不相同。同步双酶切是一种省时省力的常用方法,选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。BSA是酶的稳定剂,可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。

                    NEB双酶切buffer表

特别注意

    连接酶缓冲液中含有ATP成分,应保存于-20℃并避免反复冻融,分装使用。

 



Fermentas

Finnzymes

invitrogen

Millipore

New England Biolabs

promega

京ICP备15036693号-2    京公网安备11010802025653    版权所有:北京逸优科技有限公司       0.13

 纠 错