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      细胞中的RNA可分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类,不同组织总RNA提取实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白、DNA等杂质,最终获得高纯RNA产物的过程。

      由于RNA样品易受环境因素特别是RNA酶的影响而降解,提取高质量的RNA样品在生命科研中具有相当的挑战性。RNA提取对样品的新鲜性要求非常高,获取样品后最好立即提取RNA,若无条件立即实验,应于-80℃或液氮中保存样品,提取时取出样品后立即在低温下研磨裂解细胞,以防RNA降解。目前普遍使用的RNA提取法有两种:基于异硫氰酸胍/苯酚混合试剂的液相提取法(即Trizol类试剂)和基于硅胶膜特异性吸附的离心柱提取法。

      1、异硫氰酸胍/苯酚混合试剂的液相提取法

Trizol试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。

      2、硅胶膜特异性吸附的离心柱提取法

采用一系列裂解液裂解组织、细胞,抑制RNA酶,释放RNA,调节结合条件之后,硅胶膜特异性吸附RNA,多次漂洗去除DNA、蛋白质及其他杂质,最后经低盐溶液洗脱RNA。

     

      新技术发展赋予了RNA纯化技术更高的质量,更快的速度和更好的有效性。一些基础性的实验室技术,比如Northern blot分析,RNA保护性实验(RNA protection assays),原位杂交(in situ hybridization)和逆转录PCR(RT-PCR)等都需要高质量,高纯度的RNA样品。但是做过RNA纯化的人都知道,准备这些样品往往耗时耗力,这主要是因为那些“可恶”的即稳定又到处可见的RNAses很容易就把这些样品降解了。

      我们提供高质量的产品,可以解决您在处理RNA样品是经常遇到的问题,可以从多品种,大范围样品中提取纯化的RNA,重复性好,可用于多种基础性下游的分子生物学实验,能够满足您提取RNA全部需要的一整套的产品。


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